油红 O 是一种偶氮染料，为很强的脂溶剂和染脂剂，易溶于苯，溶于乙醇和丙酮。它常用于组织细胞中脂类的染色。
原理：
油红 O 染色的原理是其能特异性地与组织和细胞内的中性甘油三酯、脂质以及脂蛋白产生吸附作用，从而使脂肪着色。当油红 O 与脂滴接触时，会直接进入细胞或组织内的脂质中，使其染为红色。
实验步骤：
在进行油红 O 染色时，通常需要进行切片制作和染色步骤。以检测组织细胞中脂类的常用染色方法为例，染色步骤大致如下：
将肾组织或细胞玻片的冰冻切片在 PBS 中洗涤，多聚甲醛固定 30 分钟；
样品在 60%异丙醇中孵育 3 分钟，然后用新鲜制备的 60%油红 O 染色 30 分钟，60%异丙醇染色 1 分钟，用 PBS 洗涤；
样本用苏木素复染，切片使用显微镜进行可视化；
使用 ImageJ 软件按照标准程序对脂滴数量和大小进行定量。
注意事项：
l 切片类型：使用冷冻切片，因为脂质在常温下易溶解，石蜡切片不适合用于油红 O 染色（石蜡包埋过程中的脱水会使用有机溶剂，可能溶解中性脂肪）。
l 切片厚度：切片厚度可稍厚一些，建议选择 8-10μm。
l 实验对照：实验设计时建议设置阴性对照和阳性对照，如阳性对照可使用脂质丰富的肝脏组织等。
l 操作轻柔：在洗涤和封片等过程中需轻柔操作，以免破坏脂质滴的结构。
l 染液配制：现用现配油红 O 工作液，防止异丙醇长时间放置挥发导致油红工作液出现沉淀。
l 需要注意的是，不同的实验材料和具体需求可能会导致染色步骤和注意事项有所差异，在实际操作中，需根据具体情况进行适当调整。同时，油红 O 具有一定的毒性，操作时应注意防护，避免接触皮肤和吸入其粉末。
