Tunnel

细胞 TUNEL 染色（Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling）是一种常用的检测细胞凋亡的方法。

原理：

细胞凋亡时，染色体 DNA 双链或单链断裂会产生大量的 3'-OH 末端。在末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核苷酸连接到断裂 DNA 的 3'-OH 末端，并可以与标记了荧光素、过氧化物酶等的 dUTP 结合，通过显色或荧光检测来识别凋亡细胞。

实验步骤：

细胞或组织的固定和处理：通常使用多聚甲醛等固定剂固定细胞或组织切片。

通透处理：使用 Triton X-100 等试剂增加细胞膜的通透性，以便试剂进入细胞。

标记反应：加入 TdT 酶和标记的 dUTP 进行反应。

显色或荧光检测：根据使用的标记物，进行显色反应（如使用过氧化物酶标记，加入显色底物）或在荧光显微镜下观察荧光（如使用荧光素标记）。

TUNEL 染色可以在单细胞水平上检测凋亡细胞，常用于细胞凋亡的研究、疾病的病理分析以及药物研发等领域。