Masson染色

原理

Masson 染色是结缔组织染色中较经典的一种方法,又称马松染色，是显示组织中纤维的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关，分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。

然而，淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此 Masson 染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

用途

Masson 三色染色方法，是胶原纤维和肌纤维的染色方法，能够对组织和病理组织进行胶原结构的观察。

而 Van Gieson 染色是利用两种阴离子染料混合或先或后作用而完成鉴别染色，使胶原纤维呈红色（被丽春红所染）肌纤维呈黄色（被苦味酸所染）。

弹力纤维与胶原纤维染色选用维多利亚蓝、丽春红和苦味酸组合双重染色方法使弹力纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈红色，背景呈黄色。

注意事项

1、及时镜检以控制好染色程度。

2、组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。

3、0.2% 冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。

4、磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可，切勿过染。

常见问题

1、蓝色染不上或者颜色浅：脱蜡不彻底，应适当增加脱蜡时间或更换新鲜的二甲苯；苯胺蓝染色时间过短或失效，更换新鲜的苯胺蓝或增加染色时间，苯胺蓝染色后应及时镜检，若颜色浅可再次复染。

2、细胞核不着色或颜色浅：染色时间过短，或苏木素失效，或分化时间太长。Weigert 铁苏木素染色液应现用现配，以防失效；可重新染色，将组织切片放入 0.01% 氢氧化钠、0.5% 氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个 3~5 min，接着重新染色。可以适当增强组织的嗜碱性以增强核染色，如 Zenker 液固定的切片可放入 5% 碳酸氢钠溶液中 3 h，自来水冲洗 5~10 min 染色，或 Bouin 液固定的切片可放入 5% 碳酸氢钠溶液中 1 h，自来水冲洗 10 min 染色。

3、红色过深：Masson 丽春红酸性复红液染色时间过长，或分化时间不够，可适当减少染色时间或增加分化时间，染色时及时镜检以控制染色程度。